Страница: 7/7
фила. /7062/
При микроскопии в каждом мазке подсчитывали 100 нейтрофи-
лов, среди которых определяли процент клеток, содержащих отло-
жения диформазановых гранул (НСТ-позитивные нейтрофилы). Далее
расчитывали индекс активации нейтрофилов (ИАН) по формуле:
А х 0 + Б х 1 + В х 2 + Г х 3
ИАН = ─────────────────────────────────── ,
100
где: А - количество клеток, не содержащих диформазановых отложе-
ний;
Б - количество клеток, в которых площадь отложений диформа-
зана не превышает 1/3 площади ядра;
В - количество клеток, в которых названные отложения зани-
мают от 1/3 до всей величины ядра;
Г - количество клеток с диформазановыми отложениями по пло-
щади превосходит площадь ядра.
НСТ-тест может быть сделан без дополнительной стимуляции
(спонтанный НСТ-тест) или после стимуляции нейтрофилов in vitro
(индуцированный НСТ-тест). /7062/
При патологии чаще ПОЛ растет. Поэтому если лечение выбрано
правильно, то процент активированных нейтрофилов быстро падает,
опережая динамику лейкоцитарных сдвигов, СОЭ и др. /7062/
Сниженные показатели НСТ-теста ── 76 0 неблагоприятный исход
(сепсиса)
Повышенные показатели НСТ-теста ── 76 0 опасность развития гной-
ных осложнений после операции.
Нормальные показатели НСТ-теста ── 76 0 успешная терапия. /1365к/
[Преципитат с НСТ может образовывать гепарин. /1575к/90/]
На стекла с прилипшими клетками капают 5 капель (0,14 мл)
1,03% раствора нитросинего тетразолия (17мг на 14 мл).
2Лизосомально-катионный тест (ЛКТ)
Растворами исследуемых полипептидов по 50 мкл заполняли лун-
ки иммунологического планшета, в которые вносили по 20 мкл
цельной крови здоровых доноров, взятой со скарифицированной
ранки пальца руки при помощи пипетки, предварительно промытой
раствором гепарина 250 ед/мл. Полученную взвесь клеток крови
инкубировали 1 час при температуре 37С. После инкубации готови-
ли мазки, сушили на воздухе при комнатной температуре и окраши-
вали по методу В.Е.Пигаревского и соавт. (1981) в 0,1 % забуфе-
ренном спиртовом растворе зеленого прочного с рН 8,2 в течение
20 минут. Дополнительную окраску мазков проводили 0,25% водным
раствором азура А. Окрашенные препараты промывали дистиллиро-
ванной водой, высушивали на воздухе и микроскопировали с ис-
пользованием масляной иммерсии.
При исследовании просматривали 100 гранулоцитов. Внутрик-
леточное содержание катионных белков крови оценивали полуколи-
чественно по величине среднего цитохимического коэффициента
(СЦК), вычисляемого по формуле:
3а + 2б + 1,5в + 1г + 0,5д + 0а
СЦК = ─────────────────────────────────────────,
100
где: а-е - количество однотипных клеток с определенной степенью
окрашиваемости цитоплазмы зеленым прочным, а цифры
показывают степень выраженности окраски;
0 - отсутствие окраски;
0,5 - наличие в цитоплазме единичных окрашенных гранул;
1 - половина цитоплазмы заполнена светлоокрашенными гра-
нулами;
1,5 - цитоплазма равномерно заполнена гранулами, окрашен-
ными в светло-зеленый цвет;
2 - цитоплазма содержит 1/3 часть своей площади темно-
зеленых гранул;
3 - цитоплазма содержит 2/3 части своей площади темно-
зеленых гранул.
.
2Определение хемотаксической активности лейкоцитов
Недостаточный хемотаксис сдерживает мобилизацию фагоцитов,
способствуя опережающему размножению бактерий. Снижение мигра-
ционной активности нейтрофилов в 2 раза сопровождается затяжным
торпидным течением пневмонии более чем у 50% детей. /7062/
Реферат опубликован: 16/06/2005 (13685 прочтено)