Биотехнология, биопрепараты

Страница: 2/26

- МАТ (мышиные) для ИФА, иммуноблоттинга, ИФМ и пр. сероло-

гических реакций.

АЛЛЕРГЕНЫ

Известно более 200 тысяч аллергенов.

Аллергией страдает 20% населения земного шара.

I. ЭНДОАЛЛЕРГЕНЫ

- тепловые --- тепловая аллергия (на перегрев),

- ожоговые белки ("аллергия на УФ"),

- холодовые эндоаллергены (измененная конформация белков на

холоду) --- холодовая аллергия,

- появляющиеся новые антигенные детерминанты при физнагрузке

("аллергия на физнагрузку")

- появляющиеся новые антигенные детерминанты при стрессе

("аллергия на стресс")

II. ЭКЗОАЛЛЕРГЕНЫ

31) Растительного происхождения

Официально зарегистрировано 600 (598) видов аллергических

растений.

1Поллинозы на пыльцу 0. Количество пыльцы в воздухе max ранним

вечером и min утром, поэтому период активной деятельности надо

перенести на утренние часы.

Пыльца деревьев: ива, ольха, тополь, лещина, береза, дуб,

клен, ясень, рябина, вяз, липа, ильм.

Пыльца хвойных деревьев: сосна, лиственница, ель, пихта,

кедр.

Пыльца злаков: овес, рожь, пшеница, пырей, рис, овсянница,

ежа, амброзия, тимофеевка, мятлик; загряз-

няющие зерно продукты животного, токсического, химического ха-

рактера (аллергия на пшеничную или овсяную муку).

Растения, вызывающие фитодерматозы: крапива, середка тополя,

волчье лыко, одуванчик, марь, паслен, ле-

беда, полынь. /7538/91/

Аллергены цитрусовых - какие-то белковые компоненты кожуры

мандарин, лимонов, апельсин.

Лук, клубника, малина, земляника, соя ...

Чай, кофе, шоколад.

Ваниль, горчица, гвоздика, миндаль, корица, мускатный орех,

чеснок, сельдерей, перец.

32) Животного происхождения

- кожный эпителий животных (перья и пух птиц, "шерсть" жи-

вотных --- пуховые и шерстяные изделия)

- корм для аквариумных рыбок (сухие рачки и дафнии)

- экстракт тараканов

- морские продукты, особенно богатые иодом

- мед, яйца, рыба и икра, свинина, куриное мясо,

- молоко (альфа-лактальбумин, казеин) - 7% аллергий у детей;

У кипяченого молока аллергические свойства резко падают (меня-

ется структура белков). Молоко заменяют кефиром, творогом и пр.

Сыр.

- яды насекомых

- препараты крови, лечебные сыворотки.

33) 1 3микробного происхождения

- Некоторые АГ пневмококков, стафилококков, стрептококков,

- АГ дрожжей /аллергия на хлеб/,

- АГ спор плесневых грибов - ГП (М. более 40 кД),

- АГ паразитов

- АГ вакцин

- Антибиотики

34) химического происхождения

- краски, лаки, моющие средства, косметика (только 20% кос-

метических средств безопасны в отношении аллергии /1652к/),

- лекарственные препараты (сульфаниламиды, новокаин, дикаин

и др. анальгетики, анестетики /аспирин, анальгин/), [анальгети-

ки - блокируют болевую чувствительность; анестетики - подавляют

любой вид чувствительности]

- отходы химического производства /профессиональные болез-

ни/,

- рентгеноконтрастные вещества

- дезинфецирующие средства и пр.

[5) физического происхождения (см. эндоаллергены).]

6) Промышленная, бытовая и библиотечная 3пыль 0.

- клещ домашней пыли

Проба на аллергены: за рубежом накладывают манжету на предп-

лечье с 40 ячейками, в каждой их которых один из основных ал-

лергенов. Через 1-2 сут оценивается зона покраснения и соот-

ветствующая ячейка. (У пожилых лиц пробы чаще отрицательные.)

.

3АНТИТЕЛО-СОДЕРЖАЩИЕ БИОПРЕПАРАТЫ

(вызывают пассивный иммунитет)

АТ-содержащие биопрепараты включают антимикробные или анти-

токсические АТ и используются для лечения или диагностики. Ан-

тисыворотки используют по жизненным показаниям с целью экстрен-

ной серопрофилактики (при непосредственной угрозе заболевания).

1) Кровь, плазма (переливание). Сыворотки. _Антисыворотки ..

2) _Гамма-глобулины . (общие, направленного действия, получае-

мые либо после иммунизации, либо от лица, недавно перенесшего

заболевание).

3) _МАТ . (пока только мышиные, человеческие гибридомы в насто-

ящее время отсутствуют).

14) Иммунное молоко. Сочетание парентеральной и диалетической

1иммунизации позволило получить _иммунное молоко ., содержащее ан-

1титела к вибрионам холеры и токсину, ЭПКП, протеям, шигеллам

1Зонне. В настоящее время наметились 2 тенденции в технологии

1изготовления препаратов иммунного молока - получение _лактосыво-

_ 1роток или лактоглобулинов .. Лактосыворотка, в отличие от лактог-

1лобулина, обладает большей буферной емкостью, содержит ингиби-

1торы трипсина и химотрипсина, что в известной степени обеспечи-

1вает устойчивость белков коровьего молока к действию ферментов

1ЖКТ. Кроме того, некоторые белки лактосыворотки (лактоперокси-

1даза, лактоферрин, лизоцим и др.) оказывают неспецифическое ан-

1тимикробное действие и способы потенцировать защитный эффект

1специфических антител. /2114к/87/ - (ПОВТОР материала по ОКИ)

_Получение антисыворотки из молока

4Молозиво центрифугируют при 20000 об./мин. 2 часа при 4 50 4С,

4липидный слой отделяют (обезжиривание). Казеин осаждают титро-

4ванием 1Н уксусной кислотой до рН 4,6 с последующим центрифуги-

4рованием в тех же условиях. Используют надосадок, который диа-

4лизируют в 0,01М растворе фосфатного буфера с рН 7,0. Для выде-

4ления очищенной фракции Ig A можно использовать ионообменную

4хроматографию (ИОХ) на ДЭАЭ-целлюлозе. /6737/ 0

5) Антиидиотипические АТ используют для запуска активного

иммунитета, поэтому называют антиидиотипическими вакцинами 4(см.

4материал по вакцинам) 0

_ 2Получение 0 АТ .-содержащих препаратов

I. От иммунизированных животных

II. Из крови иммунных лиц (недавно выздоровевших)

_Иммунизация животных

┌────────────────────┴─────────────────────┐

селезенка мыши Кровь

│ │

выделение Ретракция сгустка

ПК, синтезирующих (40 минут, 37 5о 0С)

искомые АТ │

│ Сыворотка

ПК+ (В-лимфоцит, (=антисыворотка)

инфицированный ВЭБ │

--- лимфомная клетка) (Высаливание,

+ ПЭГ спиртовое осаждение,

│ адсорбция)

Гибридома --- активация │

│ клеток Гамма-фракция

МАТ │ иммуноглобулинов

ИФ, ФНО, ИЛ │

в питательной Аффинная хромато-

среде графия (сорбция

│ на комплекс "АГ-

│ носитель"

Реакция на │

"примеси" Моновалентные АТ

31. Иммунизация

Первая иммунизация вызывает первичный ИО; вторая и последую-

щие --- вторичный ИО. Многократную иммунизацию называют гипе-

риммунизацией (--- гипериммунная сыворотка).

Способы иммунизации животных:

2- в/кож. 0 (объем до 100 мкл) --- региональные ЛУ

2- п/кож. 0 (объем 1-30 мкл). При данном способе иммунизации

антиген распространяется медленно, т.к. подкожная клетчатка не

имеет развитых лимфатических протоков.

2- в/мыш. 0 (0,5-8мл соответственно для мышей-кроликов) в об-

ласть бедра; птицам в грудную мышцу.

2- в/бр. 0 (2-30мл соответственно для мышей-кроликов); при этом

животное опускается головой вниз;

2- в/в 0 (1-10мл); если в боковую вену хвоста, то хвост предва-

рительно опускается в стакан с горячей водой -55 5о 0С;

2- интраназально 0 (по каплям от 0,03 до 1 мл соответственно

для мышей-кроликов);

2- оральное введение 0 (0,3-5 мл): антиген смешивают с кормом и

скармливают или в виде питья, можно через зонд --- в желудок.

/7143/89/1

- 2per rectum 0

5Пример:

5Один объем антигена смешивают с 3 объемами полного адъюванта

5Фрейнда и тщательно перемешивают. Полученную эмульсию вводят

5внутрикожно по 0,1мл в 10 точек спины, расположенных по 5 в ряд

5на расстоянии 2 см по обе стороны от позвоночника. Общая доза

5иммуногена равна 10-100 мкг на кролика. Иммунизируют 6 кроликов

5массой по 2 кг. Через 8-10 недель проводят пробное кровопуска-

5ние. При удовлетворительном качестве антисыворотки последова-

5тельно проводят до 3 кровопусканий, после чего кроликам дают

5отдохнуть в течение 1 месяца и затем делают следующие кровопус-

5кания. При неудовлетворительном качестве антисыворотки проводят

5вторичную иммунизацию, используя половинную дозу иммуногена в

5неполном адъюванте Фрейнда. Иммунизируют подкожно в складку ко-

5жи на шее. Через 10 суток делают пробное кровопускание и опре-

5деляют качество антисыворотки. При неудовлетворительном качест-

5ве индивидуальной антисыворотки иммунизируют новую группу кро-

5ликов или животных другого вида. /6817/84/ 0

32. Получение крови и сыворотки

У животных или иммунизированного человека берут кровь в пус-

Реферат опубликован: 7/04/2005 (69571 прочтено)