Биотехнология, биопрепараты

Страница: 25/26

- Повышение титра АТ /с/

- повышение СРБ /с/

- ПОЛ /с/

2Определение ЦИК

(циркулирующих иммунных комплексов)

_Значение теста .. Содержание ИК помогает в оценке и мониторин-

ге активности болезни при таких состояниях, как РА, СКВ. Опре-

деление АГ-специфических ИК может оказаться полезным при обсто-

ятельствах, когда свободные АТ в сыворотке не выявляются.

/1575к/90/

_Варианты методик

1) Биологический тест

- Тест угнетения ЕА-розеткообразования (FcR) лимфоцитов боль-

ных под влиянием 10-20% аутологичной сыворотки (контроль сыво-

ротки доноров). Причем, данный тест более чувствителен, чем

другие методы.

- Реакция коагглютинации (агглютинация стафилококков

сывороткой больных. /с/

- Агглютинация эритроцитов, покрытых белком А (FcR) золотис-

того стафилококка. /2300к/

- ЦИК выявляют с помощью клеток (тромбоцитов, клеток Райи),

имеющих Fc-рецепторы, которые связывают агрегированные Ig. ЦИК

угнетает связывание с FcR частиц, например, эритроцитов, покры-

тых агрегированных иммуноглобулинами или АТ-ми. /2300к/

2) С1q-cвязывающий тест

ИК= АГ+АТ

АТ=Fab+Fc

Fc + C1q, иммобилизованный на носителе (колонке с сефаро-

зой).

Пропускают сыворотку больного через колонку, промывают, сры-

вают (высокомолярным, "кислым" /рН 3/ и пр. раствором) лиганд и

измеряют элюат спектрофотометрически.

Недостаток: ЦИК кровотока, связанные с С1q, не сядут на ко-

лонку.

3) _Осадочные реакции . (желательно с последующим определением

в осадке содержания антител /посадкой на колонку с C1q/).

Недостаток: в осадок выпадают все крупные комплексы плазмы

(обрывки мембран, фибрина, СРБ-лиганд, фибронектин-лиганд и

пр.). /с/

4а) Водно-кислотные методы.

4- Сыворотка смешивается с 10% ТХУ (трихлоруксусной кислотой)

4в соотношении 1:0,5. Надосадок после центрифугирования измеря-

4ется на спектрофотометре при длине волны 254нм. Экстинция менее

40,24 ед. считается нормой. 10% ТХУ определяет (в конечной кон-

4центрации 3,3%) осаждает белки с М. более 100 кД.

4- Осаждение "ЦИК" дистиллированной водой, подкисленной о,1М

4раствором уксусной кислоты (рН 4,6).

4К 0,1 мл инактивированной сыворотки добавляют 2 мл охлажден-

4ной до 4оС воды, перемешивают и центрифугируют 30 минут при

43000 об./мин. (при 4оС). Осадок промывают подкисленной водой,

4растворяют в 3 мл 0,1Н NaOH и измеряют количество белка при

4280нм, т.е. количество ЦИК. /2300к/

4б) Осаждение ПЭГ (полиэтиленгликолем)

4ПЭГ добавляется в определенное количество сыворотки, образу-

4ется осадок, который растворяют в физрастворе и спектрофотомет-

4рируют.

43% ПЭГ - Норма - 23-124 (показания СФ)

44% ПЭГ - Норма - 90-148

4[4) Конглютининовый тест]

45) АГ-специфические методы (после выделения специфических

4ЦИК) базируются на выявлении АГ-ов или АТ после диссоциации ЦИК

4при рН 2,8-3,2 или путем обработки раствором мочевины, цистеина

4и других веществ. /2300к-с.234/

3Коллагенозы

5- иммунная патология диффузных заболевания соединительных

5тканей. Возможен врожденный волчаночный синдром (+ АТ к ДНК, +

5врожденный порок сердца). Характерен дефицит С2.

_ 5Патогенез

5В норме антинуклеарные, антицитоплазматические и антимито-

5хондриальные антитела выявляются в высоком титре (> 1:160) у 1%

5здоровых обследованных (уровень существенно повышается с воз-

5растом). /2258к/

5Антисыворотки против нуклеарных АГ:

5- WHO 66/233, WHO 4/80.

5- Стандарты АГ - AF#CDC ANA No1; AF/CDC No 3, N 4, N 8.

_ 5Клиническая картина

5Клиническая картина СКВ характеризуется полиморфизмом. Долж-

5но быть не менее 4 признаков.

51. Недеформирующий артрит (80-90% больных).

52. Наличие LE-клеток (70-90%).

53. Цилиндроурия (15-50%), плеврит или перикардит (50-70%),

54. Алопеция (облысение) - (40-70%)

55. Эритема лица в форме бабочки (40% больных)

56. Синдром Рейно (20-40%)

57. Повышенная чувствительность к УФ лучам (30-40%).

58. Дискоидная волчанка (20-30%)

59. Изъязвление в полости рта или носоглотки (15-40% больных).

510. Выраженная протеинурия (более 4 г/л), 15-30% больных.

511. Психозы или судорожные припадки (10-20% больных).

512. Гемолитическая анемия (15%),

513. Лейкопения (ниже 4х109л-1) /40% больных/ или

5тромбоцитопения (ниже 100 х109 л-1 (10% больных),

5лимфопения.

514. Положительная реакция Вассермана в течение 6 месяцев (АТ

5к кардиолипину).

_ 5Лабораторная диагностика

5- снижение уровня Т-лимфоцитов, преимущественное угнетение

5Тs;

5- снижение ИЛ-1 макрофагами и моноцитами, ИЛ-2

5- уменьшение нормальной концентрации в сыворотке крови С4 и

5С2 компонентов комплемента

5- поликлональная активация В-системы

5- повышение уровня АТ Ig G1, G3.

5- АТ к ДНК и АТ 2-го порядка (АТ к АТ)

5- наличие АТ против определенных субпопуляций лимфоцитов

5- связь с HLA гаплотипом А2, B7, В8, D3,

5или с гаплотипом А11, B7, В35, DR2, DR3; рекомендуется

5обследовать родственников больного для выявления ранних

5форм заболевания. /2300к/

3Склеродермия

5- Нарушение функции фибробластов (несовершенный коллаген)

5- Антиядерные АТ (80% больных)

5- антифосфолипидные АТ,

5- АТ к Scl (70%)

5- АТ к РНК-полимеразам, топоизомеразе ядер

5- ревматоидный фактор (РФ) - антитела класса Ig M к Fc-фраг-

5менту Ig G и Ig Е. /2300к/

5- АТ против центромеры

5- лимфоцитотоксины

5- гипер-гамма-глобулинемия,

5- ЦИК

5- снижение уровня Т-лимфоцитов. /2300к/

3Синдром Шегрена

5Шегрен в 1933г. описал синдром, состоящий из трех основных

5симптомов:

51. сухого кератоконъюнктивита, │sicca-синдром

5(ксерофтальмия-?) │

52. ксеростомии, │

53. ревматоидного артрита. Ревматическое поражение начинается

5раньше, к нему присоединяется поражение слюнных желез. /1407к/

5+ синуситы,

5+ сухость кожи,

5+ анацидность,

5+ цистит, пиелит,

5+ анемия, СКВ, макроглобулинемия, полимиозит, склеродермия,

5васкулит, узелковый периартериит, иммунный тиреоидит, иммунный

5гемолиз и прочие аутоиммунные болезни. /1407к/

5Болезнь характеризуется разрушением железистого эпителия во

5всем организме. /1407к/

_ 5Этиология

5Аутоиммунный процесс. Органоспецифические аутоантитела про-

5тив 0

5- щитовидной железы,

5- слизистой желудка,

5- мышц,

5- ревматоидный фактор (Ig G против Ig M),

5- противоядерный фактор. /1407к/

_ 5Патогенез

5В слюнных железах лимфоцитарная инфильтрация, в первую оче-

5редь вокруг полосатых протоков. В эпителии протоков наблюдается

5пролиферация лимфоцитов, эпителий ацинусов погибает (остаются

5островки пролиферирующего эпителия). = доброкачественное лимфо-

5эпителиальное поражение. Может переходить в злокачественную

5лимфосаркому. /1407к/ 0

5- Лейкопения

5- РФ (70-90%)

5- антиядерные АТ (50-70% больных)

5- АТ к АГ слюнных желез

5- снижение Т-клеток и соотношения CD4/CD8=Тх/Тs (норма

51,5-2,5). /2300к/

_ 5Клиника

5- Набухание слюнных желез,

5- сухость во рту (в тяжелых случаях у больного полностью от-

5сутствует слюна). В таком случае затруднено глотание.

5- По всему телу прощупываются ЛУ, ревматические узлы.

5- Депрессия. /1407к/

_ 5Лечение

5- кортикостероиды, ударные дозы преднизолона,

5- витамин В12

5- психо- и физиотерапия. /1407к/

3Узелковый периартериит

_ 5Лабораторная диагностика

5- Лейкоцитоз

5- Гипо-гамма-глобулинемия

5- Антинуклеарные АТ

5- РФ

5- АТ против кардиолипина

5- HBs-АГ или его АТ (30% больных). /2300к/

3Ревматоидный артрит

5ИК --- активация комплемента.

5Ревматоидные узелки состоят из фибрина, лимфоцитов, макрофа-

5гов.

_ 5Лабораторная диагностика

5- РФ = аутоАТ (класса Ig M) к Fc-фрагменту Ig - ревматоидный

5фактор (выявляются у 70-90% больных).

5- Увеличение СОЭ

5- Повышение СРБ

5- Повышение альфа-2-глобулинов, а затем и гамма-глобулинов.

5- Анемия

5- Умеренный лейкоцитоз

5- Генетическая связь с HLA А11, DR4, DR53, DQ4.

5- Наличие муциновых преципитатов в синовиальной жидкости.

5/2300к/

5- Уменьшение количества лимфоцитов. /2300к/

5- Повышается уровень бета-2-макроглобулина в крови в 2-5

5раз. /2300к/

_ВЫЯВЛЕНИЕ ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ IV ТИПА

2Лабораторная диагностика

- Анализ крови и подсчет лимфоцитов. Количество Т-лимфоцитов

определяют по АГ и рецепторам.

- Рентгенологическое обследование вилочковой железы.

- Функциональную активность Т-лимфоцитов определяют по про-

лиферации (РБТЛ), образованию цитокинов, лимфокинов, а

также по цитотоксическим и регуляторным эффектам. /2300к/

- Подавление миграции лейкоцитов.

- Изменение прилипаемости лейкоцитов.

Реферат опубликован: 7/04/2005 (69557 прочтено)